• 一、醋酸白試驗(yàn)
            用3-5%醋酸外涂疣體2-5分鐘,病灶部位變白稍隆起,肛門(mén)病損可能需要15分鐘。本試驗(yàn)的原理是蛋白質(zhì)與酸凝固變白的結(jié)果,HPV感染細(xì)胞產(chǎn)生的角蛋白與正常的未感染上皮細(xì)胞產(chǎn)生的不同,只有前者才能被醋酸脫色。醋酸白試驗(yàn)檢測(cè)HPV的敏感性很高,它比常規(guī)檢測(cè)觀察組織學(xué)變化還好。但偶爾在上皮增厚或外傷擦破病例中出現(xiàn)假陽(yáng)性、假陽(yáng)性變白跡象顯得界限不清和不規(guī)則。美國(guó)CDC提示,醋酸白試驗(yàn)并不是特異試驗(yàn),且假陽(yáng)性較常見(jiàn)。
            二、免疫組織學(xué)檢查
            常用過(guò)氧化物酶抗過(guò)氧化物酶方法(即PAP),顯示濕疣內(nèi)的病毒蛋白,以證明疣損害中有病毒抗原。HPV蛋白陽(yáng)性時(shí),尖銳濕疣的淺表上皮細(xì)胞內(nèi)可出現(xiàn)淡紅色的弱陽(yáng)性反應(yīng)。
            三、組織化學(xué)檢查
            取少量病損組織制成涂片,用特異抗人類(lèi)乳頭瘤病毒的抗體作染色。如病損中有病毒抗原,則抗原抗體結(jié)合。在過(guò)氧化物酶抗過(guò)氧化物酶(PAP)方法中,核可被染成紅色。此法特異性強(qiáng)且較迅速,對(duì)診斷有幫助。
            四、病理檢查
            主要為角化不全,棘層高度肥厚,乳頭瘤樣增生,表皮突增厚,延長(zhǎng),其增生程度可似假性上皮瘤樣。刺細(xì)胞和基底細(xì)胞并有相當(dāng)數(shù)量的核分裂、頗似癌變。但細(xì)胞排列規(guī)則,且增生上皮和真皮之間界限清楚。其特點(diǎn)為粒層和刺層上部細(xì)胞有明顯的空泡形成。此種空泡細(xì)胞較正常大,胞漿著色淡、中央有大而圓,深嗜堿性的核。通常真皮水腫、毛細(xì)血管擴(kuò)張以及周?chē)^致密的慢性炎性浸潤(rùn)。Bushke-loewenstein巨大型尖銳濕疣,表皮極度向下生長(zhǎng),代替了其下面的組織、易與鱗狀細(xì)胞相混,故須多次活檢。若有緩慢發(fā)展之傾向, 則為一種低度惡變的過(guò)程,即所謂疣狀癌。
            五、基因診斷
            迄今,HPV難于用傳統(tǒng)的病毒培養(yǎng)及血清學(xué)技術(shù)檢測(cè),主要實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)是核酸雜交。近年來(lái)發(fā)展的PCR方法具有特異、敏感、簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),為HPV檢測(cè)開(kāi)辟了新途徑。
           。ㄒ唬(biāo)本的采集及處理
            1.標(biāo)本的采集和預(yù)處理:用刮板或生理鹽水浸潤(rùn)的棉棒從陰道和宮頸外口取分泌物和細(xì)胞。在作細(xì)胞學(xué)檢查的同時(shí),將標(biāo)本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中,用PBS離心(3000g,10min)洗滌2次,沉積細(xì)胞重懸于1mlPBS中,取0。5ml細(xì)胞懸液抽提DNA。
            2.標(biāo)本核酸的提。喊1體積細(xì)胞懸液加10倍體積的細(xì)胞裂解液(10mmol/L Tris-HCl,pH 7.4,10mmol/L EDTA,150mmol/L NaCl,0.4%SDS,1.0mg/ml蛋白酶K)37℃下處理過(guò)夜;且等體積酚/氯仿(1:1),氯仿/異戊醇(24:1)各抽提2次;加1/10體積3mol/L NaAc(pH 5.2)及2.5倍體積無(wú)水乙醇置-20℃ 2h或過(guò)夜沉淀DNA;加1體積乙醇洗滌1次;用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/L Tris-HCl,pH 8.0,1.0mmol/L EDTA)溶解DNA,37℃溫育30min。
           
          專(zhuān)家
          李國(guó)山

            李國(guó)山,皮膚科主任,中國(guó)皮...<詳細(xì)>

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